Genetische Methoden:
- Genotypisierung mittels PCR-Methode sowie Echtzeit-PCR-Techniken (z. B. TaqMan-Assays).
- Erstellung von Genexpressionsprofilen (Blut, Gewebeproben, Postmortem, Tiermodelle, Zellkulturen, iPSC usw.) unter Verwendung quantitativer Echtzeit-RT-PCR-Methoden und Microarrays.
- In-situ-Hybridisierungsverfahren für die Lokalisierung.
Biochemische Analyse:
- Proteinanalyse mittels Western Blot, ELISA und immunhistochemischer/immunzytochemischer Analyse.
- Fluoreszenz- und kolorimetrische zytochemische Analyse und Auswertung mittels computergestützter Software für Dichte und Lokalisierung.
- Enzymatische Aktivitätstests - Einfluss von Therapie und Genen.
Zellkultur-Modelle:
- Neuronale Zelllinien zur Behandlung von Differenzierung, Proliferation und Zelltod.
- Primäre Zellkulturen für Studien zur Arzneimitteltherapie.
- Lymphoblastoid-Zellkulturen von Betroffenen und Kontrollpersonen werden zur Untersuchung molekularer Mechanismen verwendet.
- Zelllinienmodelle unter Verwendung von siRNA-/Plasmid-Methoden zur Down-/Out-Regulierung eines bestimmten Gens.
- Reporter-Assays.
- Live-Cell-Imaging-Techniken zur Überwachung von Veränderungen in neuronalen Zellkulturen.
Induzierte pluripotente Stammzellen (iPSC):
- Isolierung und Züchtung von Keratinozyten und PBMCs aus Haarfollikeln und Blutproben von Patienten und gesunden Personen.
- Reprogrammierung somatischer Zellen in iPSCs und anschließende Differenzierung in neurale Vorläuferzellen und reife neuronale Zellen.
- Untersuchung der molekularen Ursachen und der therapeutischen Auswirkungen auf Patienten unter Verwendung von aus iPSCs gewonnenen neuronalen Zellen.
Elektrophysiologie:
- In-vitro-Aufnahmen neuronaler Aktivität und synchronisierter Netzwerke werden mit einem Mehrkanalsystem (MEA2100 und Multiwell-ME) durchgeführt.
- Gemeinsame HD-MEA Messungen werden mit Prof. Andreas Hierlemann (ETHZ) durchgeführt.
Zell-Analyse-Werkzeug:
Der xCELLigence Echtzeit-Impedanz-Zellanalysator wird eingesetzt, um das Wachstum oder den Tod von adhärenten Zellen unter verschiedenen Behandlungen oder Manipulationen kontinuierlich über Stunden und Tage zu überwachen.
- Echtzeit-Impedanz-Analysator als Werkzeug zur Beschreibung molekularer Pfade, die an Neurotoxizität und Neuroprotektion in einer neuronalen Zelllinie beteiligt sind.
Begleitdokument herunterladen:
Marinova, Z., Walitza, S., & Grünblatt, E. (2014). Real-Time Impedance-based Cell Analyzer as a Tool to Delineate Molecular Pathways Involved in Neurotoxicity and Neuroprotection in a Neuronal Cell Line. JoVE, (90) (PDF, 966 KB)
